Addition of exogenous cytokines in mixed lymphocyte culture for selecting related donors for bone marrow transplantation
Palavras-chave:
Cultura mista de linfócitos, Transplante de medula óssea, Citocinas, Enxerto, HospedeiroResumo
CONTEXTO: Ensaios de cultura mista de linfócitos têm levado a opiniões divergentes sobre a seleção de doadores compatíveis em transplante de medula óssea. Uma associação entre cultura mista de linfócitos positiva e o desenvolvimento de GVHD (do inglês: graft-versus-host disease) é ainda incerta. O uso de citocinas exógenas em cultura mista de linfócitos poderia ser uma alternativa para aumentar a sensibilidade de testes de cultura. OBJETIVO: O objetivo de nosso estudo foi aumentar a sensibilidade da cultura mista de linfócitos entre doador e receptor irmãos HLA-idênticos, usando citocinas exógenas, com o objetivo de prever GVHD e/ou reações de rejeição após transplante de medula óssea. TIPO DE ESTUDO: Estudo prospectivo. LOCAL: Unidade de Transplante de Medula Óssea, Universidade Estadual de Campinas. PARTICIPANTES: 17 pacientes com doenças hematológicas e seus respectivos doadores selecionados para o transplante de medula óssea. MÉTODOS: ensaios de cultura mista de linfócitos padrão e modificada pela suplementação com citocinas foram realizados com células de doadores e receptores, previamente tipados para os antígenos HLA. Respostas em culturas foram medidas pela incorporação total de isótopos em contagem por minuto (cpm) após os ensaios. RESULTADOS: Quando comparada ao método padrão, a média das respostas na cultura modificada aumentou duas vezes com IL-4 (p < 0,001) e 6,4 vezes com IL-2 (p < 0,001), para respostas autólogas do doador; 1,9 vezes com IL-4 (p < 0.001) e 4,1 vezes com IL2 (p < 0,001), para respostas do doador versus receptor; foi observado um aumento não significativo com IL-4 e uma média de 20% de inibição da resposta com IL-2 (p < 0,001), nas respostas do doador versus indivíduos não-aparentados. Nenhuma das citocinas mostrou diferença significativa em respostas de controles não-aparentados versus receptor. CONCLUSÃO: Entre os ensaios propostos aqui para aumentar a sensibilidade da cultura, a suplementação do meio com IL-4 foi o melhor, uma vez que células dos pacientes tiveram um maior crescimento que no método padrão, usando células do doador ou de indivíduos não-aparentados como estimuladoras. Contudo, IL-4 também aumentou as respostas autólogas, embora de uma forma menos intensa quando comparada a IL-2. Em conclusão, com esta perda de especificidade nós acreditamos que não vale a pena modificar a cultura mista de linfócitos tradicional, nem mesmo com a adição de IL-4.
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